依托骨髓嵌合模型研究证耐药实体瘤内Treg清除有望规避自身免疫损伤

美国加州伯克利大学研究团队依托普锐斯X‑RAD 320小动物X射线辐照仪构建标准化骨髓嵌合小鼠模型，深入解析肿瘤微环境内调节性T细胞（Treg）的免疫抑制机制。研究证实，仅选择性清除肿瘤局部Treg即可规避全身性自身免疫损伤；该干预通过cDC2‑CD4⁺‑IL2信号轴强效活化NK细胞，有效抑制MHCⅠ缺失、NKG2D配体阳性的CD8抵抗型肿瘤。靶向CCR8抗体可实现临床转化级别的特异性瘤内Treg耗竭，为免疫治疗耐药实体瘤提供全新低毒干预策略。

图1：论文封面概要

构建MC38、B16F10、RMA等MHCⅠ缺陷型荷瘤小鼠；采用Foxp3‑DTR‑GFP基因工程小鼠，分别开展全身、肿瘤局部白喉毒素（DT）介导的Treg清除实验；搭配CD4、CD8、NK、树突状细胞特异性耗竭抗体开展细胞功能验证。利用普锐斯X‑RAD 320小动物X射线辐照仪完成全身清髓，制备骨髓嵌合受体小鼠；检测指标涵盖肿瘤生长曲线、小鼠生存周期、多脏器免疫流式表型、NK细胞转录组、体外肿瘤杀伤实验，同步对比抗CCR8、抗CTLA‑4抗体的体内治疗效果。

依托普锐斯X‑RAD 320小动物X射线辐照仪对受体小鼠实施移植前分次全身清髓：单次5 Gy，分两次照射，两次间隔16小时，充分清除宿主原有造血及免疫细胞；等待8周完成骨髓造血重建后，再开展肿瘤接种与免疫干预试验。

图 2：（原文 Fig.1A-B）展示骨髓辐照、肿瘤接种及 Treg 清除完整动物实验流程。

主要研究结果

1. 毒性差异对比：全身性Treg清除会诱发小鼠体重下降、淋巴组织异常增生等自身免疫毒性；仅瘤内局部清除Treg不会损伤外周正常免疫，同时可显著抑制MHC缺陷肿瘤进展。

2. 核心抑制机制：肿瘤微环境中Treg持续消耗IL‑2，阻断cDC2介导CD4⁺效应T细胞分泌IL‑2；清除瘤内Treg后IL‑2大量蓄积，激活NK细胞STAT5信号通路，上调穿孔素、颗粒酶表达，强化NK细胞肿瘤杀伤能力；该抑瘤效应完全依赖NK细胞与CD4⁺T细胞，不依靠CD8⁺T细胞。

3. 临床转化验证：全身给药抗CCR8抗体可选择性清除瘤内Treg，在皮下瘤、原位乳腺癌、肉瘤多种模型中均可重现NK细胞主导的抗肿瘤效果，无明显全身免疫紊乱副作用。

图 3：（原文 Fig.7O）直观呈现 cDC2-CD4-IL2-NK 抗肿瘤完整分子通路模型。

结论

依托普锐斯X‑RAD 320小动物X射线辐照仪搭建的标准化骨髓嵌合模型证实，瘤内Treg是NK细胞抗肿瘤功能的关键抑制节点；局部耗竭Treg可解除IL‑2剥夺，通过cDC2‑CD4⁺‑IL2通路充分激活NK细胞，有效攻克CD8⁺T细胞抵抗型实体瘤。靶向CCR8抗体可安全、特异性清除肿瘤内Treg，规避全身性免疫毒性，为临床免疫耐药实体瘤提供新型低毒治疗思路。

图 4：（原文 Fig.1）对比全身与瘤内 Treg 清除后的肿瘤生长及小鼠毒性差异。

原文出处DOI：10.1126/sciimmunol.adx4411